貨號(hào)：74004 痕量樣品總RNA提取試劑盒 (50)
英文名稱：RNeasy Micro Kit (50)
中文名稱：痕量樣品總RNA提取試劑盒 (50)
品 牌：Qiagen
貨 號(hào)：74004
74004 痕量樣品總RNA提取試劑盒 從細(xì)胞或組織樣本中純化至多45 μg的總RNA
數(shù)分鐘內(nèi)快速純化得到高品質(zhì)總RNA
即用型RNA在各種下游應(yīng)用中表現(xiàn)良好
微量起始樣本， RNA產(chǎn)量穩(wěn)定
無需酚/抽提
無需CsCl梯度離心，無需LiCl或乙醇沉淀
RNeasy Micro Kit于從微量細(xì)胞和組織樣本中純化至多45 μg RNA。使用RNAlater RNA Stabilization Reagent或Allprotect Tissue Reagent方便的穩(wěn)定組織樣本，使用TissueRuptor或TissueLyser體系高效破碎樣本。可在QIAcube全自動(dòng)核酸分析儀上應(yīng)用RNeasy Micro Kit實(shí)現(xiàn)RNA純化全自動(dòng)化。處理更大的樣本，可使用RNeasy Mini Kit（離心柱結(jié)合能力為100 µg RNA）、RNeasy Midi Kit（離心柱結(jié)合能力為1 mg RNA）或RNeasy Maxi Kit（離心柱結(jié)合能力為6 mg）。 特點(diǎn) | 參數(shù) |
應(yīng)用 | PCR, qPCR, real-time RT-PCR, microarray |
洗脫體積 | 10–14 µl |
規(guī)格 | Spin column |
主要樣本類型 | Tissue, cells |
處理 | Manual |
純化總RNA、miRNA、poly A+ mRNA、DNA或蛋白 | RNA |
樣本量 | <5 mg |
技術(shù) | Silica technology |
每次運(yùn)行或制備時(shí)間 | 30–40 minutes |
產(chǎn)量 | Varies |
性能
RNeasy Micro Kit可從微量樣本中得到高產(chǎn)量總RNA，且重復(fù)性好。從少量細(xì)胞，包括單細(xì)胞以及微量標(biāo)準(zhǔn)組織樣本中都能純化得到總RNA（參見Reliable RNA isolation from a single cell、Highly reproducible yields for sensitive applications和High-quality total RNA from fine needle aspirates）。RNeasy Micro Kit通過高效的柱上基因組DNA消化可使珍貴的樣本在定量基因表達(dá)分析中得到zui大的敏感度，如real-time RT-PCR（參見Efficient on-column removal of genomic DNA）。
原理
RNeasy Micro Kit于從微量樣本中純化總RNA，如顯微切割組織、細(xì)針穿刺樣本、微量纖維組織包括心臟和肌肉組織、微量細(xì)胞、甚至是單細(xì)胞（如FACS篩選細(xì)胞）。處理顯微切割FFPE組織，我們*使用RNeasy FFPE Kit。RNeasy技術(shù)整合了*/異硫氰酸胍裂解的嚴(yán)謹(jǐn)性和硅膠膜純化的速度和純度，簡化了總RNA的純化技術(shù)。RNeasy MinElute離心柱*的設(shè)計(jì)可確保zui小的洗脫體積，小至10 µl，實(shí)現(xiàn)RNA的高度濃縮。小洗脫體積意味著下游的反應(yīng)可控制在小體積范圍內(nèi)，提高反應(yīng)效率。高純度確保全部樣本可用于反轉(zhuǎn)錄等下游應(yīng)用，無酶抑制。
操作流程
RNeasy Micro Kit于從微量樣本中純化總RNA。先對(duì)樣本（<5 mg組織或<5 x 105個(gè)細(xì)胞）進(jìn)行破碎和勻漿。在裂解物中加入乙醇以提供合適的結(jié)合條件。然后將裂解物上樣至RNeasy MinElute離心柱，RNA（至多45 µg）結(jié)合到硅膠膜上。RNeasy Micro Kit包含RNase-free DNase，確保簡單、高效的柱上基因組DNA消化，適用于敏感的應(yīng)用。DNase和其他污染物被高效洗去后，10–14 µl水洗脫得到高濃度的純化RNA。
應(yīng)用
RNeasy Micro Kit純化得到小洗脫體積（10 µl）RNA，重復(fù)性好，適用于敏感的定量基因表達(dá)分析，包括以單細(xì)胞為起始樣本的real-time RT-PCR。
