LP-UV-NIR260 紫外可見近紅外分光光度計(jì)吸收的本質(zhì):分光光度法是利用物質(zhì)對(duì)不同波長(zhǎng)光的選擇吸收特性而建立起
來的分析方法。通常利用棱鏡或光柵分光來取得單色光,使單色光連續(xù)地依次通
過溶液,并測(cè)得該溶液對(duì)每一波長(zhǎng)的吸收,得到吸收光譜曲線。
吸收光譜來源于物質(zhì)對(duì)光的選擇吸收,這是物質(zhì)的宏觀現(xiàn)象,而吸收的本質(zhì)
是分子內(nèi)部運(yùn)動(dòng)和光相互作用的結(jié)果。當(dāng)物質(zhì)的分子吸收一定能量或波長(zhǎng)的光譜
后,透過的光譜中有些波長(zhǎng)被吸收就形成了吸收光譜。吸收的能量愈小,則相應(yīng)
的光的波長(zhǎng),吸收峰出現(xiàn)在較長(zhǎng)波段。當(dāng)吸收在紅外區(qū)時(shí)形成紅外吸收光譜,如
果吸收能量愈大,則相應(yīng)的波長(zhǎng)愈短,吸收峰出現(xiàn)在較短波段,當(dāng)吸收在紫外區(qū)
產(chǎn)生紫外吸收光譜。
2)LP-UV-NIR260 紫外可見近紅外分光光度計(jì)吸收定律—朗伯比耳定律:當(dāng)一束平行單色光通過均勻的溶液時(shí),其吸光度
與溶液的濃度和厚度的乘積成正比。
其數(shù)字表達(dá)式:A=KCL=LogI0/I=-LogT
吸收定律數(shù)字表達(dá)式成立的前提:①,入射光為單色光,②,吸收過程中各
物質(zhì)無相互作用,各物質(zhì)吸光度具有加和性,③,光與物質(zhì)的作用*于吸收過
程,沒有熒光散射和光化學(xué)現(xiàn)象,④,吸收物是一種均勻分布的連續(xù)體系,
3)影響分光光度法的原因:
a,輻射與物質(zhì)的非吸收作用引起的誤差,
b,熒光與光化學(xué)反應(yīng)的影響,一般說來,熒光對(duì)分光光度測(cè)量產(chǎn)生的誤差
可以忽略,多數(shù)情況下顯色體系的熒光效率很小,而且熒光發(fā)射是各向同性,只
有一小部分沿著透射光方向進(jìn)入檢測(cè)器,使測(cè)量吸光度偏低,產(chǎn)生負(fù)偏離。熒光
對(duì)吸收測(cè)量的影響*程度上決定于儀器的吸收池和檢測(cè)器光學(xué)設(shè)計(jì),
c,反射和散射,吸收定律只適用于均勻介質(zhì)的吸收體系,渾濁溶液因散射
使實(shí)測(cè)吸光度增加,導(dǎo)致偏離比耳定律,
d,儀器的非理想性引起的誤差,
e,復(fù)色光對(duì)比耳定律的偏離,大多數(shù)光度計(jì)只能獲得接近于單色光的狹窄
的光通帶,實(shí)際上仍是有復(fù)色光性質(zhì),可導(dǎo)致偏離比耳定律。偏離的大小取決于
二單色光的摩爾吸光系數(shù)差△ε,|△ε|很小時(shí),可近似認(rèn)為是單色光,在低濃
度時(shí),工作曲線仍為直線,但濃度較大時(shí),隨濃度增大,A-C曲線彎曲愈嚴(yán)重,
故比耳定律只適用于稀溶液,