詳細介紹
農藥速測卡適用于糧食作物中有機磷和氨基甲酸酯類農藥殘留的快速檢測。它是用對農藥高度敏感的丁酰酯酶和顯色劑做成的酶試紙,同時配備農殘速測增強劑,可以進一步提高了產品對有機磷農藥的靈敏度,以滿足糧食農藥殘留檢出限低的要求。糧食農藥速測卡操作使用簡便、檢測結果穩定可靠、產品貯存容易、攜帶方便,是現場檢測的方法。
1、原理
丁酰酯酶對有機磷農藥高度敏感,根據酶活性的抑制情況就可以檢測到微量的農藥殘留。丁酰酯酶可催化靛酚乙酸酯(紅色)水解為乙酸與靛酚(藍色),有機磷類農藥對丁酰酯酶有抑制作用,使催化、水解、變色的過程發生改變,由此可判斷出樣品中是否有過量有機磷類農藥的存在。
含硫類有機磷殺蟲劑是糧食生產中比較常用的農藥,多數毒性較高。采用溴制劑(農殘速測增強劑)對糧食樣品提取液進行氧化前處理,可以顯著降低這類農藥的檢出限,提高丁酰酯酶對這類農藥的檢測靈敏度。
2、試劑
2.1糧食農藥速測卡:固化有丁酰酯酶和靛酚乙酸酯顯色劑的酶試紙(簡稱速測卡)。
2.2pH 7.8磷酸緩沖液:隨產品附送,每包用1000 mL純化水溶解。
2.3農殘速測增強劑(溴制劑):隨產品附送。
3、儀器
3.1農藥殘留速測儀。
3.2樣品粉碎機。
3.3礱谷機。
3.4電子天平(0.1 g)。
3.5超聲波清洗儀。
3.6低速離心機。
3.7可調移液器(10~100 μL,1~5 mL)。
4、分析步驟
4.1樣品處理
4.1.1把糧食樣品粉碎至95%以上通過20目篩(稻谷應先脫殼),稱取10 g樣品,倒入提取瓶,加入30 mL pH 7.8的磷酸緩沖液混勻。
4.1.2用超聲波清洗儀超聲5 min,待溶液分層后取上層提取液2 mL于試管內,4000 r/min離心1 min;取1 mL上清液,加入50 μL農殘速測增強劑,備用。
4.2檢測過程
4.2.1將農藥殘留速測儀接通電源,開機預熱,溫度達到40℃后,設定預反應時間為10min,顯色時間為3min。
4.2.2取出糧食農藥速測卡,先對折一下形成折痕,然后插入農藥殘留速測儀的卡槽中(白片在下,紅片在上)。先取80 μL pH 7.8磷酸緩沖液加到空白對照卡的白色藥片上,然后依次取80 μL糧食樣品提取液分別加到其余的白色藥片上,按下開始鍵,預反應10 min。
4.2.3聽到鳴音提示后將農藥殘留速測儀上蓋合下來,使白色藥片和紅色藥片充分接觸,發生顯色反應3min。
4.2.4再次聽到鳴音提示后將農藥殘留速測儀上蓋打開,觀察顯色反應的結果,以空白對照卡所顯藍色作為標準,判斷糧食樣品的檢驗結果。
4.2.5如果沒有條件配置農藥殘留速測儀,也可以直接用手代替儀器進行檢測,放置10 min預反應后,用手對折捏3 min,打開觀察結果。用手操作,容易受環境溫度和各人手溫影響。
5、結果判定
結果以丁酰酯酶被有機磷類農藥抑制(為陽性)、未抑制(為陰性)表示。
與空白對照卡比較,糧食樣品速測卡的白色藥片不變色或略有淺藍色均為陽性結果。
對測定結果為陽性的樣品,應重復檢驗2~3次,進一步通過其他分析方法確定具體農藥種類和含量。
如果空白對照卡沒有顯示藍色,說明檢測不正常,可能是速測卡失效或者環境中有相關農藥和干擾物質存在,或者是加樣的量不夠,需要排除有關問題后再進行檢測。